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核糖核酸酶A
2024-05-13
产品详情
- 价格：1037
- 产品名称核糖核酸酶A
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- 简介
核糖核酸酶A
中文:核糖核酸酶A
货号: HMD3902-01
规格:100mg
中文同义词:核糖核酸酶 A
产品信息
核糖核酸酶 A
产品描述
核糖核酸酶 A(Ribonuclease A,常用缩写RNase A),一种含 4 个二硫键的单链多肽,分子量约为 13.7 kDa(氨基酸序 列)。作为一种核糖核酸内切酶(endoribonuclease),特异性降解单链 RNA 上的胞嘧啶(C)或尿嘧啶(U)残基。具体来 说,切割识别的是由某核苷酸上的 5’-核糖和相邻的嘧啶类核苷酸 3’-核糖上磷酸基团形成的磷酸二酯键,从而使得 2’, 3’-环 磷酸水解为对应的 3’-核苷磷酸(比如,pG-pG-pC-pA-pG经 RNase A 切割产生 pG-pG-pCp 和 A PG)。RNase A 切割单链 RNA 活性最高,推荐工作浓度为 1-100 μg/mL,兼容于各种反应体系。低盐浓度(0-100 mM NaCl),可用来切割单链 RNA, 双链 RNA,以及 RNA-DNA杂交形成的 RNA 链。然而,高盐浓度(≥0.3 M),RNase A 仅特异性切割单链 RNA。核糖核酸酶 A(RNase A)最常见的应用在于质粒 DNA 或基因组 DNA 制备过程中去除RNA,此制备过程中 DNase 酶活性的存在与
否是需要重视的污染之一,可采用水浴煮沸这种传统方法来灭活 DNase 活性。另外,本品还可用于 RNA 酶保 护分析、RNA 序列分析等分子生物学实验。
运输与保存方法
冰袋运输。-25~-15℃干燥保存。有效期 2年。
储存液制备
【注】:此为 RNase A 储存液配制的常用方法之一,也可以根据实验室传统的方法,或者参考文献资料使用其他方法制备 储存液(如直接溶于 10 mM Tris-Cl, pH7.5;或者 Tris NaCl 溶液)。
1)利用 10 mM 的醋酸钠(pH5.2)制备 10 mg/mL 的 RNase A 储存液;
2)100℃加热 15 min;
3)冷却到室温,加入1/10 体积的 1 M Tris-HCl(pH7.4),调其pH 至 7.4(例如,5 mL 10 mg/mL 的 RNase储存液加入 500 μL 1 M Tris-HCl, pH7.4);
4)分装于-25~-15℃冻存,可稳定保存长达 2年。 【注】:在中性条件下煮沸 RNase A 溶液,会有 RNase 沉淀形成;在更低的 pH 下将其煮沸,如有沉淀可以观察到,可能由 于蛋白杂质存在造成。煮沸之后若发现沉淀,可通过高速离心(13,000 rpm)去除杂质,然后分装冻存。
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