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肌氨酸氧化酶
2024-05-13
产品详情
- 产地 中国
- Cas：9029-22-5
- 价格：988
- 产品名称肌氨酸氧化酶
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- 简介
肌氨酸氧化酶/9029-22-5
中文:肌氨酸氧化酶
英文:SOX
CAS:9029-22-5
分子式:45 kDa (SDS-PAGE)
纯度:≥90%
货期:24h
货号:HH0301-01
规格:3ku
中文同义词:肌氨酸氧化酶;肌氨酸氧化酶;肌氨酸氧化酶/SAO;
英文同义词:SAO;SOX;
技术指标
外观:黄色无定型冻干粉末;蛋白纯度: ≥90%; 比活性: ≥15 U/mg 酶粉;过氧化氢酶:≤0.03%; 肌酐酶: ≤0.01%; 肌酸酶: ≤0.01%; ATP 酶: ≤0.005%
酶学性质
来源:微生物;分类: EC 1.5.3.1;分子量: 45 kDa(SDS-PAGE);等电点: 5.3;Km值: 5.6×10-3 M(Sarcosine);抑制剂: SDS,Zn2+,Cd2+;最适pH: 8.0;最适温度:50℃;pH稳定性:7.0-9.5(25℃,16 h);热稳定性:50℃ 以下稳定(pH 7.5,30 min);稳定性:-25~-15℃ 静置保存 12 个月保持 90% 以上活性。
用途:用于酶法肌酐试剂的研发和大量配制。
活性测定方法:
肌氨酸氧化酶插图
反应生成的醌亚胺(Quinoneimine dye)可在 555 nm 检测。
酶活定义:单位酶活定义为在下述条件下,每分钟催化生成1μmol H2O2所需的酶量。
试剂准备
试剂I:0.2 M Tris-HCl 缓冲液,pH 8.0。
试剂II:1.0 M 肌氨酸溶液(8.9 g 肌氨酸溶解到 100 mL UP 水中)。
试剂III:1 kU/mL POD。
试剂IV:50 mM 4-AA溶液(1.016 g 4-AA溶于100 mL UP水)。
试剂V:50 mM TOOS溶液(1.657 g TOOS溶于100 mL UP水)。
酶稀释液:20mM Tris-HCl,pH 8.0,2mMEDTA。
按如下配制反应混合物:试剂I:5 mL;试剂II:10 mL;试剂III:0.25 mL;试剂IV:1.5 mL;试剂V:1.5 mL;双蒸水:31.75 mL;共50 mL,可用于50次反应。
操作步骤
1. 向1 mL比色皿中加入1 mL反应混合物。
2. 37℃ 温浴 5 min。
3. 向反应混合物中加入 20μL 待测酶液,混匀。
4. 37℃ 反应,在 555 nm 检测样品1 min内的吸光度变化(ΔAs)
*用酶稀释液替代酶液,其它步骤相同,所得溶液吸光度为空白吸光度(ΔAb)ΔA=ΔAs-ΔAb
活力计算
肌氨酸氧化酶插图1
1.020:反应液总体积(mL);
0.020:酶液体积(mL);
t:反应时间(1min);
df:稀释倍数;
1/2:1摩尔过氧化氢生成1/2摩尔醌亚胺染料;
1.0:光路长度(cm);
C:酶浓度(mg/mL);
39.2:标准反应条件下,生色基团在 555 nm 处毫摩尔吸光系数(cm2/μmol)。
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